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离子对被合适的有机溶剂提取后，形成有色溶液，可供比色测定。

影响定量分析的因素1.水相的适pH值2.酸性染料的影响提取完全是提取常数和酸性染料阴离子的浓度密切相关的，而提取常数的大小由是与B-的种类和有机溶剂的选择密切相关的。一般用的有甲基橙、溴麝香草酚蓝（BTB）和溴甲酚绿等。

3.有机溶剂的影响离子对提取常数的大小还与有机溶剂的性质有关。通常有机溶剂与离子对形成氢键的能力强，则提取效率高，如氯仿和二氯甲烷等具有中等程度的提取率，并且提取的选择性也较好，为常用的有机溶剂。

4.水分的影响有有机溶剂提取有色的离子对时，应严防水分的混入。

5.共存物的影响：一般赋形剂，重型、酸性乙基弱碱性的物质均不干扰测定，强酸可改变染料溶液或缓冲液的pH，因而对测定有干扰。

以上五种影响因素中，水相的适pH和有机溶剂对离子对的提取完全是酸性染料比色法的试验关键。

应用与实例硫酸阿托品片剂紫外分光光度法利血平含量测定，注意避光操作。

糖类和苷类药物单糖和双糖分子中有不对称碳原子，均具有一定的比旋度。

鉴别试验1.灼烧试验：糖类用直火加热，先熔融膨胀，后燃烧并发生焦糖臭，遗留多量的炭。蔗糖的鉴别可应用本试验。

2.Fehling反应单糖或含有半缩醛基的双糖分子结构中，均有醛基或酮基，都具有还原性。Fehling反应是在碱性酒石酸铜试液（Fehling试液）中，糖将铜离子还原，生成红色的氧化亚铜沉淀。

葡萄糖的鉴别可用此反应（无水葡萄糖、葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液和莪术油葡萄糖均用Fehling反应）

蔗糖的鉴别：加硫酸煮沸，用氢氧化钠中和，再加碱性酒石酸铜试液，加热，生成氧化亚铜的红色沉淀。

葡萄糖和乳糖的杂质检查葡萄糖的一般检查项目：酸度、氯化物和硫酸盐；溶液的澄清度与颜色；乙醇溶液的澄清度；亚硫酸盐与可溶性淀粉。

葡萄糖注射液中5-羟基糠醛的测定：紫外分光光度法。

乳糖的杂质检查：利用蛋白质类杂质遇硝酸汞试液产生的白色絮状沉淀，进行特殊杂质“蛋白质”的检查。

原料药的含量测定：葡萄糖、乳糖和蔗糖不规定含量测定，规定比旋度的范围。

制剂：葡萄糖注射液的含量测定：旋光度法。

测定中加入氨试液的作用：由于药用葡萄糖是D-葡萄糖，而D-葡萄糖有α和β两种互变异构体，因而药用葡萄糖是他们的混合物，比旋度相差甚远，而在水溶液中逐渐平衡，称作变旋。加热、加酸或加弱碱可加速平衡。

计算因素1.0426的由来：

换算为含税葡萄糖浓度（c‘）时，则应为：

葡萄糖氯化钠注射液含量测定：硝酸银滴定法，每1ml硝酸银滴定液（0.1mol/L）相当于5.844mg的NaCl.加糊精溶液以形成保护，使氯化银沉淀呈胶体状态，则具有较大的表面，有利于对指示剂的吸附，有利于滴定终点的观察。

加硼砂溶液是为了增加pH值，因为本品pH值过低，而pH值低于3.5时，则五沉淀出现。加入2.5%硼砂溶液2ml后，溶液pH值为7，可促使荧光黄电离，以增大荧光黄阴离子的有效浓度，使重点变化敏锐。

苷类药物苷类为糖的衍生物（如氨基糖、糖醛酸等）与另一非糖有机化合物通过糖的端基碳原子连接而成的化合物。

鉴别试验：

1.Keller-Kiliani反应α-去氧甲基五碳糖的反应α-去氧糖类，如洋地黄毒糖和磁麻糖，是由糖类分子中与羰基相邻近的“CHOH”基失去氧，转变为“CH2”后的结构。具有较大的活泼性，由α-去氧糖与苷元结合的生成物（即苷类）容易水解。

将甾体强心苷溶于含有微量FeCl3（1滴9% FeCl3）的冰醋酸1～2ml中，沿管壁缓缓加入浓硫酸1～2ml，使成两液层。两液层交界面处显棕色（甲地高辛显紫色）；醋酸层显蓝色或蓝绿色，放置1h后显靛蓝色。

2.Kedde反应苷元的不饱和内酯侧链反应。

甾体强心苷元的C17上常有α-β或β-γ的不饱和内酯，即丁烯内酯，在碱性水溶液中易与芳香硝基化合物形成有色的络合阴离子。

Kedde反应用于去乙酰毛花苷的鉴别。

加乙醇溶解后加二硝基苯甲酸试液与乙醇制氢氧化钾试液各10滴，摇匀后，溶液即显红紫色。

3.色谱法① 纸色谱法：用于地高辛的鉴别② 薄层色谱法：用于去乙酰毛花苷及其注射液的鉴别，采用硅藻土G薄层板。

③ 高效液相色谱法：用于甲地高辛及其片剂的鉴别特殊杂质的检查药物 特殊杂质 允许限量 检查方法洋地黄毒苷 洋地黄皂苷 本品10mg溶于2ml乙醇后，加胆甾醇的醇溶液，10min内，不得发生沉淀地高辛 洋地黄毒苷 6% 纸色谱法甲地高辛 有关物质 5% 高效液相色谱法去乙酰毛花苷 有关物质 10% 薄层色谱法含量测定1.比色法：甾体强心苷元C17上的丁烯内酯部分是非常活泼的，很容易和芳香硝基化合物（如碱性三硝基苯酚试液）形成络合阴离子。所得络合物在可见光去具有特征的吸收峰（λmax为485～495nm）。

本法用于地高辛、去乙酰毛花苷及其注射液的含量测定2.荧光法：利用L-抗坏血酸与过氧化氢等实际可使地高辛或洋地黄毒苷产生荧光的原理，提高了定量分析的灵敏度，从而可用于每片含主药量分别仅为0.25mg和0.1mg的片剂的含量测定。

地高辛片含量，含量匀度（限度为20%），溶出度（限度为65%，转篮，100r/min，60min）

甲地高辛溶出度测定与地高辛一样，限度规定相同。

3.色谱法：

① 柱色谱法：用于洋地黄毒苷原料药测定的纯化处理② 高效液相色谱法：用于甲地高辛及其片剂的含量测定，内标：洋地黄毒苷。