2011年执业药师考试药学专业知识(一)复习要点(12)
六、应用
(一)鉴别 供试液主峰的保留时间与对照液一致
(二)杂质检查 《中国药典》用HPLC杂质检查方法有5种
1)内标法加校正因子
校正因子( f ) =(As /Cs) / (AR/CR) 含量 (Cx) = f · Ax / (AS /CS )
2)外标法 含量 (Cx) = CR · (Ax / AR)
3)加校正因子的主成分自身对照法：对照溶液为供试品溶液的稀释溶液
4)不加校正因子的主成分自身对照法 无杂质对照品
5)面积归一化法
(三)含量测定 内标法加校正因子法、外标法
§4. 气相色谱法 gas chromatography， GC
一、基本原理
采用气体流动相;不适于难挥发和热稳定性差的物质的分析;各组分按K大小顺序依次被载气带出色谱柱产生分离
二、气相色谱仪
(一)载气源 FID多用氮气或氦气为载气，氢气为燃气，空气为助燃气。TCD多用氦气或氢气为载气;ECD多用氮气或氩气为载气。
(二)进样方式 可分为溶液直接进样、顶空进样
(三)色谱柱 填充柱或毛细管柱
(四)柱温箱 控温精度在±1℃
(五)检测器：
1.火焰离子化检测器(FID)
氢气为燃气，空气为助燃气。检测器温度应高于柱温，并不低于150℃®¾防水气凝结，(否则倒流)，通常为 250 ℃ - 350 ℃
2. 氮磷检测器NPD 适于含氮、磷元素的药物
3. 火焰光度检测器FPD 适于含氮、硫元素的药物
4. 电子捕获检测器ECD 主要用于含卤素药物
5. 质谱检测器MS 能给出相应的结构信息
6. 热导检测器 TCD 检测组分的浓度变化
浓度型：TCD、电子捕获检测器ECD
(六)数据处理系统
三、常用固定液与载体
1. 常用的固定液：常用的鲨鱼烷是标准非极性固定液
硅氧烷类 ：SE-30、SE-54、OV-17、OV-25等
醇类：聚乙二醇(PEG)是常用的固定液之一
2. 载体(担体) 作用：承载固定液
为化学惰性的多孔性微粒，常用硅藻土型载体：红色载体和白色载体。
3. 毛细管色谱柱：开管型毛细管柱和填充型毛细管柱
★★四、色谱系统适用性试验
在各品种项下规定色谱条件下，除检测器种类、固定液品种及特殊指定的色谱材料不得改变外，其余如色谱柱内径、长度、载体牌号、粒度、固定液涂布浓度、载气流速、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变。
(1)色谱柱的理论踏板数(n) n=5.54(tR/ Wh/2)2
(2) 分离度 (R) R=2(tR2-tR1)/(W1+W2) R ³ 1.5
(3)重复性： RSD ≤2.0%
(4)拖尾因子(T)： 0.95 ~ 1.05
六、应用
(一)鉴别 供试液主峰的保留时间与对照品溶液一致
(二)杂质检查： 内标法加校正因子、外标法、面积归一化法和标准溶液加入法
(三)在含量测定中的应用： 内标法、外标法和标准溶液加入法
§5. 电泳法 (electrophoresis)
在电场的作用下，带电颗粒向其所带电荷相反的电极方向移动， 根据各组分淌度的不同而得到分离的方法。
(一)基本原理
v=mE
双电层与电渗：电泳所用的支持物(如滤纸)在溶液中带负电，而使接近其表面的缓冲液带正电，且形成双电层。在电场的作用下，带正电的缓冲液整体向负极移动，形成电渗。
影响电泳分离的条件：(1)缓冲液的pH值和离子强度 (2)电场强度 (3)样品浓度
★★(二)各类电泳法
(1) 纸电泳法
(2) 醋酸纤维素薄膜电泳法
(3) 琼脂糖凝胶电泳法
(4) 聚丙烯酰胺凝胶电泳法
(5) SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 测定蛋白质分子量
(三)应用 鉴别、分子量测定、纯度测定
二、毛细管电泳法(capillary electrophoresis，CE)
毛细管电泳的分离模式：
1.毛细管区带电泳(CZE)
2.毛细管凝胶电泳(CGE)
3.毛细管等速电泳(CITP)
4.毛细管等电聚焦电泳(CIEF)
5.胶束电动毛细管色谱 (MEKC或MECC)
6.毛细管电色谱(CEC)
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